ContinuarCapítulo 6:
Métodos de Recuento y Determinación de viables
Sección
2: Método de recuento en placa: por siembra en superficie
Este tipo de siembra recibe estos dos nombres y se caracteriza porque durante la incubación las colonias crecen en la superficie del agar.
Se utilizan placas previamente preparadas que contienen el medio de cultivo solidificado (unos 15 mL/placa). Se deposita en la superficie del agar 0.1 mL de la muestra o de cada dilución. Luego de realizada la descarga de la muestra, se procede a extenderla sobre toda la superficie de las placas, usando un asa de Drigalski estéril..
Luego de realizada la descarga de la muestra, se procede a extenderla sobre toda la superficie de las placas, usando un asa de Drigalski estéril.
Esperar 2 ó 3 minutos a que se seque el inóculo
Se llevan las placas a incubar (la temperatura y el tiempo de incubación elegidos varía según el tipo de microorganismos).
Pasado el tiempo de incubación las colonias habrán crecido sobre la superficie del agar.
Elegir de entre todas las placas las dos correspondientes a aquella dilución que presenten un número de entre 30 y 300 colonias /placa (esto proporciona una precisión estadística suficiente y no es engorroso de hacer).
Para realizar el contaje, se utiliza un cuenta-colonias; se pone la placa de Petri con la base hacia arriba y, si es preciso, se divide en sectores marcando mediante un lápiz graso a lo largo de los diámetros.
El número de unidades formadoras de colonia o UFC/mL de la muestra original será:
Número de UFC/g = Número de colonias x factor de dilución x 10
Tener en cuenta que en la expresión anterior:
S "Número de colonias" = media del número de colonias contadas en cada una de las placas de la dilución elegida
S "Factor dilución" = inverso de la dilución elegida para el recuento
